速遞！2025版GB4789.3/GB4789.30/GB4789.38標準修訂亮點
發(fā)布時間：2025-03-28 瀏覽次數(shù)：108
好消息！好消息！大家期待已久的《GB?4789.3-2025 食品微生物學(xué)檢驗?大腸菌群計數(shù)》《GB?4789.38-2025??食品微生物學(xué)檢驗?大腸埃希氏菌計數(shù)》《GB?4789.30-2025??食品微生物學(xué)檢驗?單核細胞增生李斯特氏菌檢驗》終于在這春暖花開的季節(jié)發(fā)布了，新標準修訂內(nèi)容不僅體現(xiàn)了國內(nèi)標準與國際標準接軌的趨勢，而且使標準方法操作和結(jié)果報告處理更加靈活簡單又快捷。為了方便大家快速清晰地了解這些新變化，小編梳理了一下這三個標準修訂內(nèi)容的亮點，具體見下表：
| 標準 | 修訂內(nèi)容 |
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| GB 4789.3-2025 大腸菌群計數(shù) | 亮點一、創(chuàng)新：增加了大腸菌群測試片法，并明確測試片應(yīng)以發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣為陽性結(jié)果判斷依據(jù)，且性能符合 GB4789.28 中相關(guān)培養(yǎng)基的質(zhì)量要求。
亮點二、靈活：液體樣品稀釋明確了當樣品不適宜進行體積取樣時，按 6.1.1 固體和半固體樣品稱重操作。
亮點三、省時：MPN計數(shù)法 復(fù)發(fā)酵試驗培養(yǎng)時間由“ 48h±2h ”修改為“ 24-48h ”，若最短培養(yǎng)時間內(nèi)得到陽性結(jié)果，則檢驗周期可縮短 24h。
亮點四、全面：
1）在平板法 9.2 接種與培養(yǎng)中增加“對于乳及乳制品，應(yīng)置于 30℃±1℃ 培養(yǎng) 18h~ 24h ?！边@是基于國內(nèi)外文獻報道，培養(yǎng)溫度為 30 ℃ 時乳制品中大腸菌群平板計數(shù)的結(jié)果，顯著高于培養(yǎng)溫度為 36 ℃ 的計數(shù)結(jié)果，在國外相關(guān)標準中已將乳制品中大腸菌群平板計數(shù)培養(yǎng)溫度規(guī)定為 30 ℃ 左右，以及修標單位經(jīng)調(diào)查研究和實驗驗證后，作出的修訂。
2）明確MPN 計數(shù)法初發(fā)酵試驗，如接種體積超過 1mL ，則加到等體積的雙料LST肉湯中；
3）MPN 計數(shù)法初發(fā)酵試驗陽性結(jié)果描述由“ 觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生 ”修改為“ 小倒管或產(chǎn)氣收集裝置內(nèi)有氣泡產(chǎn)生，或輕輕振搖 LST肉湯管 可見試管內(nèi)有細密氣泡不斷上升者，判斷為產(chǎn)氣”，更加詳細明了。
4）MPN計數(shù)法 的結(jié)果與報告增加“ 附錄C 確定最適的 3個連續(xù)稀釋度方法”，平板法的結(jié)果與報告增加“ 附錄D 規(guī)定了大腸菌群菌落數(shù)的計算、數(shù)值修約和結(jié)果報告的方式，并給出了相關(guān)示例?！保略龈戒涀寣嶒灲Y(jié)果處理變得簡單。 |
| GB 4789.30-2025 單核細胞增生李斯特氏菌檢驗 | 亮點一、與國際接軌：
1）參照 ISO 方法和經(jīng)起草組驗證，將 定性檢驗 和 MPN法 中的選擇性增菌液體培養(yǎng)基由 LB1 和 LB2 修改為“ Fraser增菌肉湯(FB1、FB2)”；選擇分離顯色培養(yǎng)基“李斯特氏菌顯色平板“修改為“OA李斯特氏菌顯色平板”并在 附錄A 培養(yǎng)基和試劑中增加了 OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基配方。
2）參照 ISO 等國際、國家標準，將平板計數(shù)規(guī)則“ 所有平板菌落數(shù)合計在 15CFU ～ 150CFU 之間的平板，計數(shù)典型菌落數(shù)?！毙薷臑椤八衅桨宓湫秃涂梢删鋽?shù)合計在 15CFU ～ 150CFU 之間的平板，計數(shù)典型和可疑菌落數(shù)。”經(jīng)驗證可提高結(jié)果的穩(wěn)定性。
亮點二、實惠省時：
1）結(jié)合我國現(xiàn)行有效的與單增李斯特菌限量指標相關(guān)的標準將平板計數(shù)，“ 8.2 樣品的接種 ”將原來“ 每個稀釋度的樣品勻液分別吸取 1mL 以 0.3mL、0.3mL、0.4mL 的接種量分別接種 3塊李斯特氏菌顯色平板”修改為“ 每個稀釋度分別吸取 0.1mL 樣品勻液，接種1個 OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基（或其他等效的李斯 特氏菌顯色培養(yǎng)基）平板 ”，大大減少了顯色培養(yǎng)基的用量，又能滿足現(xiàn)行產(chǎn)品標準需要。同時繼續(xù)保留“ 0.3mL、0.3mL、0.4mL 涂布法”，滿足檢出限更低的需求和方法的延續(xù)性。
2）在“ 5.5 鑒定 ”中增加“ 如選擇生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統(tǒng)，可不經(jīng) 5.4 初步鑒定，直接從 TSA-YE平板或羊血平板上挑取可疑菌落，用生理鹽水制備成濁度適當?shù)木鷳乙?，使用微生物生化鑒定試劑盒或微生物生化 鑒定系統(tǒng)進行鑒定。”結(jié)合使用生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統(tǒng)實際情況，優(yōu)化鑒定流程，縮短檢驗時長。
亮點三、嚴謹：
1）在 8.2 樣品的接種中增加“ 8.2.3 從樣品稀釋至樣品接種完畢不得超過 45min?！北苊獠僮鲿r間過長影響計數(shù)結(jié)果。
2）在“ 5.2 分離 ”中增加顯色培養(yǎng)基菌落識別注意事項（避免假陰性和假陽性結(jié)果）： “注1：一些單核細胞增生李斯特氏菌在 OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上的菌落周圍的暈圈不明顯甚至沒有暈圈。還有一些單核細胞增生李斯特氏菌在 OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上的菌落周圍的暈圈出現(xiàn)得比較遲緩，有時需要 4d 以上才出現(xiàn)。
注2：伊氏李斯特氏菌在 OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)與單核細胞增生李斯特氏菌相似。” |
| GB 4789.38-2025 大腸埃希氏菌計數(shù) | 亮點一、與國際接軌：參考 ISO 方法和經(jīng)起草組驗證，將大腸埃希氏菌MPN計數(shù)中復(fù)發(fā)酵陽性管劃線分離培養(yǎng)基 EMB 和平板計數(shù) VRBA-MUG 修改為“ 胰蛋白胨膽鹽 X-葡萄糖醛酸苷(TBX)瓊脂 ”，菌落觀察更加直觀清晰。并刪除了 MPN計數(shù)法“ 靛基質(zhì)試驗、MR-VP試驗和檸檬酸鹽利用試驗 ”對分離平板上可疑菌落進行鑒定的內(nèi)容，檢驗時長縮短至少 24h。
亮點二、嚴謹：
1）刪除了術(shù)語和定義；增加了檢驗原理，并注明“ 絕大多數(shù)大腸埃希氏菌具有β-葡萄糖醛酸苷酶活性，但大腸埃希氏菌O157 等菌株沒有β-葡萄糖醛酸苷酶活性。另外，腸桿菌科內(nèi)一些志賀氏菌、沙門氏菌等菌株也具有β-葡萄糖醛酸苷酶活性?！?/span>
2）本新標準 MPN法中新增“ 對貝類及產(chǎn)品采用每個稀釋度接種 5管 LST肉湯的方法?！辈⑶倚略鱿鄳?yīng)“ 附錄C 貝類及產(chǎn)品中大腸埃希氏菌最可能數(shù)(MPN)檢索表”。
3）MPN計數(shù)法 初發(fā)酵試驗陽性結(jié)果描述由“ 觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生 ”修改為“ 小倒管或產(chǎn)氣收集裝置內(nèi)有氣泡產(chǎn)生，或輕輕振搖 LST肉湯管可見試管內(nèi)有細密氣泡不斷上升者，判斷為產(chǎn)氣”，更加詳細明了。 |
最后，環(huán)凱微生物為助力各食品微生物檢驗實驗室輕松應(yīng)對新標準更新帶來的工作量和挑戰(zhàn)，現(xiàn)已整理出相應(yīng)產(chǎn)品解決方案供選擇（見以下列表）！
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培養(yǎng)：36°℃，培養(yǎng)24h 判讀：含有四氮唑指示劑，菌落為紅色，發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸（黃色酸環(huán)）和產(chǎn)氣（伴有氣泡）。
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CRM019 OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基（單增菌落：藍綠色光滑規(guī)則小菌落，周圍有乳白色脂肪沉淀環(huán)）
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CRM018A/CRM018 胰蛋白胨膽鹽X-葡萄糖醛酸苷(TBX)瓊脂培養(yǎng)基（大腸埃希氏菌菌落：藍綠色）
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GB4789.3-2025?大腸菌群計數(shù)產(chǎn)品解決方案
GB4789.30-2025 單核細胞增生李斯特氏菌檢驗產(chǎn)品解決方案
GB4789.38-2025?大腸埃希氏菌計數(shù)產(chǎn)品解決方案
