產(chǎn)品名稱:OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基
英文名稱:Agar Listeria according to Ottaviani and Agosti
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品類型 | 包裝規(guī)格 |
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CRM019 | 干粉基礎(chǔ) | 1000mL配制用量/瓶 |
SR0750(無需額外購買) | 配套試劑 | 5支/盒 |
產(chǎn)品用途:用于單增李斯特氏菌的計(jì)數(shù)、分離和確認(rèn)。
檢驗(yàn)原理:蛋白胨、大豆胨和酵母粉提供氮源和微量元素;葡萄糖提供碳源;丙酮酸鈉、甘油磷酸鎂、硫酸鎂、氯化鋰促進(jìn)菌體細(xì)胞生長,調(diào)節(jié)酶活;氯化鈉維持均衡的滲透壓;磷酸氫二鈉為緩沖劑;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷為顯色底物,與李斯特氏菌的β-葡糖苷酶發(fā)生特異性水解反應(yīng),釋放出顯色基團(tuán),使李斯特氏菌屬細(xì)菌形成綠色菌落;而李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基配套試劑含卵磷脂和抗生素,可抑制雜菌生長,使具有卵磷脂酶的單增李斯特氏菌在綠色菌落周圍形成乳白色脂肪沉淀環(huán)。
OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基配方成分:
配方 | 含量(每升) |
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蛋白胨 | 18.0g |
胰蛋白胨(胰酪胨) | 6.0g |
酵母膏粉 | 10.0g |
丙酮酸鈉 | 2.0g |
葡萄糖 | 2.0g |
甘油磷酸鎂 | 1.0g |
萘啶酮酸 | 0.02g |
多粘菌素B | 76700IU |
L-α-磷脂酰肌醇 | 2.0g |
硫酸鎂(無水) | 0.5g |
氯化鈉 | 5.0g |
氯化鋰 | 10.0g |
磷酸氫二鈉(無水) | 2.5g |
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃葡萄糖苷 | 0.05g |
瓊脂 | 15.0g |
頭孢他啶 | 0.02g |
環(huán)己酰亞胺 | 0.1g |
最終pH | 7.2±0.2 |
使用方法:稱取本品干粉72.1 g,加入950 mL純化水,攪拌加熱至完全溶解(可按比例擴(kuò)增或縮小),121℃高壓蒸汽滅菌15 min,冷至約50℃?zhèn)溆?。每支李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基配套試劑(SR0750)添加10mL無菌純化水,振蕩溶解(可使用渦旋振蕩器振蕩3-5min),再添加于190mL上述已冷卻至50℃左右的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,充分混勻后傾注無菌平皿,待凝固,備用。
OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基質(zhì)量控制(下列質(zhì)控菌株接種后于35~37℃培養(yǎng)24±3h,觀察結(jié)果如下表:)
指標(biāo) | 質(zhì)控菌株及編號 | 標(biāo)準(zhǔn)值 | 特征性反應(yīng) |
生長率 | 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌ATCC19115 | PR≥0.5 | 藍(lán)綠色光滑規(guī)則小菌落,周圍有乳白色脂肪沉淀環(huán) |
單核細(xì)胞增生李斯特氏菌CMCC(B)54007 | |||
特異性 | 英諾克李斯特氏菌ATCC33090 | —— | 藍(lán)綠色光滑規(guī)則小菌落 |
選擇性 | 大腸埃希氏菌ATCC25922 | G≤1 | —— |
糞腸球菌ATCC29212 | |||
白色念珠菌ATCC10231 |
儲存條件與保質(zhì)期:2-8℃,貯存于避光、干燥處。貯存期2年。
參考文獻(xiàn):ISO 11290-1:2017 Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and of Listeria spp. — Part 1: Detection method