金葡標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法常見(jiàn)的難點(diǎn)
發(fā)布時(shí)間：2024-11-20 瀏覽次數(shù)：1599
來(lái)源：環(huán)凱轉(zhuǎn)載于“ 六扇門(mén)Study”公眾號(hào)，作者~SIXDoors
前段時(shí)刻，某專(zhuān)業(yè)群有老師發(fā)了一張BP平板圖
“哇，好漂亮的涂布板”
（圖片來(lái)自網(wǎng)友分享）
由此引發(fā)了大家對(duì)金葡標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法的討論
1、怎么操作才能涂布出這么漂亮的板？
2、GB4789.10-2016版標(biāo)準(zhǔn)對(duì)金葡典型和可疑菌落的表述不清晰，新標(biāo)準(zhǔn)會(huì)如何修改？
BP板涂布操作技巧寶典
選擇合適的稀釋梯度，這個(gè)很關(guān)鍵，如果稀釋梯度不夠，菌落密集疊加，很難分開(kāi)，上圖如果菌落再少一半，就更完美了。
平板里傾注的BP培養(yǎng)基不能太薄，4mm較好。
使用微量移液槍將樣品轉(zhuǎn)移到平板上，控制樣品的流量，使其不會(huì)濺出平板。
涂布時(shí)最好使用翹起頂端L棒，涂布更均勻。標(biāo)準(zhǔn)中要求涂布0.3，0.3，0.4，盡量不要涂0.4，平均成0.3，0.35，0.35，分布相對(duì)更平均一點(diǎn)，也更容易吸收。
涂布時(shí)盡量涂干，如果涂布后，液體吸收不好，可以放在潔凈工作臺(tái)上，繼續(xù)吹五分鐘就可以了。
冷藏過(guò)的平板需要恢復(fù)到室溫后再使用，同時(shí)注意平板表面不能有冷凝水，免得影響涂布效果。最好一個(gè)一個(gè)培養(yǎng)皿攤開(kāi)，恢復(fù)室溫會(huì)比較快，否則疊放在一起，中間的平板可能會(huì)沒(méi)有恢復(fù)到室溫。
典型和可疑菌落的表述很重要
上圖是2016版標(biāo)準(zhǔn)對(duì)BP平板上金黃色葡萄球菌典型菌落的描述，大家看看懵圈不？
首先，8.4.1對(duì)菌落的描述，這是典型菌落？還是可疑菌落？
描述的有“不透明沉淀環(huán)和清晰帶”的算，沒(méi)有的也算，到底啥樣的算？
還是前半部分描述的是典型菌落，后半部分是可疑菌落？
其次，8.4.2先選擇了典型菌落，然后8.4.3再?gòu)牡湫途淅镞x擇可疑菌落，誰(shuí)告訴小六，到底怎么選？
結(jié)果計(jì)算的要求又是計(jì)算典型菌落，“可疑菌落”選出來(lái)是干啥用的？
8.4.2還說(shuō)3個(gè)平板所有菌落數(shù)合計(jì)在20CFU~200CFU 之間的平板,計(jì)數(shù)典型菌落數(shù)；
第九章又說(shuō)“典型菌落數(shù)在20CFU~200CFU 之間”，這前后表達(dá)也不一致?。?/p>
典型和可疑菌落的表述很重要，與后面計(jì)數(shù)和確認(rèn)時(shí)挑取菌落的選擇原則有密切關(guān)系。
坊間傳聞，GB4789.10啟動(dòng)修訂
標(biāo)準(zhǔn)會(huì)修改Baird-Parker 平板菌落形態(tài)描述，提高標(biāo)準(zhǔn)適用性。建議增加一些典型圖例，方便大家理解。
此外，新標(biāo)準(zhǔn)還計(jì)劃修改以下內(nèi)容：
（1）第一法定性檢測(cè)，增加金黃色葡萄球菌顯色平板法；
（2）第二法定量檢測(cè)，增加“金黃色葡萄球菌測(cè)試片”初篩方法，提高檢測(cè)效率，據(jù)說(shuō)已經(jīng)完成實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證；
（3） 附錄 B 增加金葡總腸毒素檢測(cè)，優(yōu)化腸毒素提取流程，據(jù)說(shuō)是酶聯(lián)免疫方法，可采用試劑盒或全自動(dòng)酶聯(lián)免疫設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)，現(xiàn)在還在驗(yàn)證階段；
（4）標(biāo)準(zhǔn)中增加“質(zhì)控菌株”。
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