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HEPES溶液與PBS緩沖液的對比

發(fā)布時間:2022-04-12    瀏覽次數(shù):4544

生物緩沖液可穩(wěn)定水溶液的 pH 值,因此被廣泛使用于生物實驗中。而過去常用的傳統(tǒng)緩沖液 ,如碳酸鹽緩沖液和磷酸鹽緩沖液,在很多生物實驗中不適用。這些試劑在 pH 7.5 以上不能有效的緩沖, 并會產(chǎn)生一些干擾反應(yīng)。因此Norman Good 博士等人于1966 年提出了一系列可解決傳統(tǒng)緩沖液限 制的兩性離子緩沖液,這些緩沖液的pKa 值等于或接近生理 pH 值,對細胞無毒,且不會通過細胞膜吸收。在此為您整理出較常用的PBS(Phosphate buffered saline)與HEPES使用上的優(yōu)缺點。

HEPES與PBS對比

 HEPESPBS
有效的pH范圍6.8-8.25.8-8.0
生物毒性不具生物毒性不具生物毒性
滲透壓使用 0.1 M HEPES 顯著提高了培養(yǎng)基的滲透壓。具備等滲透壓的特性,可防止細胞破裂。
細胞活力HEPES 緩沖系統(tǒng)中可以看到更高的最大細胞密度和活力。PBS 稀釋的細胞培養(yǎng)樣品可能會無意中降低細胞活力。
與金屬離子的關(guān)系可以忽略不計的金屬離子產(chǎn)生絡(luò)合物或沉淀。與部分金屬離子結(jié)合會產(chǎn)生絡(luò)合物或沉淀。
與酶促反應(yīng)的關(guān)系適合用于酶促反應(yīng)可能會抑制酶促反應(yīng)
在冷凍情況下的變化HEPES 溶液的冷凍不會導(dǎo)致 pH 變化。PBS 溶液的冷凍導(dǎo)致顯著的 pH 變化。
高壓滅菌不可高壓滅菌可高壓滅菌
用于電子顯微鏡研究的前綴固定劑Hepes 代替 PBS 避免了這種沉淀由于磷酸鹽與二價陽離子有關(guān)。較高濃度的PBS會導(dǎo)致嚴重沉淀,從而阻止細胞有效過濾到過濾器上使用
用于層析法于層析法中適用于層析法中適用
HClO熒光檢測不適用適用
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