產(chǎn)品名稱:LwaCas13a Nuclease
中文名稱:LwaCas13a 核酸酶
產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格:
編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 價(jià)格 |
HKE381 | LwaCas13a Nuclease | 200pmol | crispr基因編輯(Cas13 核酸酶) | 2745 |
產(chǎn)品描述:
Cas13a 核酸酶(又名 C2c2)是 VI 型 CRISPR-Cas 系統(tǒng)效應(yīng)蛋白,具有 RNA 介導(dǎo)的 RNA 內(nèi)切酶活性。在靶標(biāo)單鏈RNA 存在 PFS 序列的情況下,可特異性地切割靶標(biāo) RNA。此外,Cas13a 還具有依賴于靶標(biāo)單鏈 RNA 的反式切割活性(即旁路切割活性),可用于開發(fā)靶標(biāo)核酸的快速檢測(cè)試劑盒。
本公司開發(fā)的 Cas13a Nuclease 源自 Leptotrichia wadei(Lwa) 細(xì)菌,采用大腸桿菌重組表達(dá),純度超過(guò) 95%,既可以用于體外 RNA 切割,體外 RNA 檢測(cè),也可用于活細(xì)胞 RNA 的調(diào)控、RNA 基因編輯,同時(shí)也可以用于光學(xué)探針生物學(xué)標(biāo)記。Cas13a 在體外與 crRNA 穩(wěn)定結(jié)合,將 Cas13a/crRNA(或者 crRNA 質(zhì)粒)轉(zhuǎn)入細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi) RNA 的編輯,Cas13a/crRNA 也可以被靶RNA 激活,從而實(shí)現(xiàn)體外高靈敏度的 RNA 檢測(cè)。
使用建議:
1) 建議全程在冰上配制體系。
2) 為了保證反應(yīng)的正常進(jìn)行,需使用高質(zhì)量的 RNA 模板。
3) 使用 RNase Free 的耗材(離心管、槍頭等)。
產(chǎn)品說(shuō)明:
保存溫度:-80℃保存。
LwaCas13a Nuclease 產(chǎn)品包裝(A包裝):
產(chǎn)品組成 | 體積 |
LwaCas13a Nuclease(5pmol/μl) | 40 μl |
10×Cas13a Reaction Buffer | 1 mL |
保存體系:500mM NaCl,20mM sodium acetate,0.1mM EDTA,1mM TCEP,50% (v/v) Glycerol,pH6.0,at 25℃。
質(zhì)量保證:經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE 膠檢測(cè)僅可見清晰單一的目的條帶,純度達(dá) 95%;內(nèi)毒素含量<100EU/mg;qPCR 方法檢測(cè)無(wú)大腸桿菌基因組殘留;無(wú) RNase、核酸內(nèi)、外切酶污染。
切割體系(20μL):(在冰水浴上混合以下體系:)
10×Cas13a Reaction Buffer | 2 μl |
靶標(biāo) ssRNA(500nM) | 1 μl |
crRNA(500nM) | 2-8 μl |
ssRNA reporter (FAM-BHQ1)(10μM) | 0.5 μl |
LwaCas13a Nuclease 1-6pmol RNase Free Water | To 20 μl |
37 ℃每 30-60s 收集一次熒光,80-99cycles。