產品名稱:NLS-Cas9 Nuclease
中文名稱:NLS-Cas9 核酸酶
產品編號與包裝規(guī)格:
編號 | 產品名稱 | 規(guī)格 | 產品介紹 | 價格 |
HKE365-01A | NLS-Cas9 Nuclease | 50μg/盒 | crispr基因編輯(核酸酶) | 1365 |
產品描述:CRISPR/Cas9是細菌和古細菌在長期演化過程中形成的一種適 應性免疫防御系統(tǒng)。CRISPR/Cas9系統(tǒng)通過將入侵噬菌體和質粒 DNA的片段整合到CRISPR序列中,并利用相應的CRISPR RNAs (crRNAs)來指導Cas9蛋白對同源序列的降解,從而提供免疫性。 人工改造過的Cas9/sgRNA系統(tǒng)通過sgRNA(short guide RNA)引導 Cas9蛋白識別并剪切帶有sgRNA靶點的雙鏈DNA,可用于基因敲除 和精確編輯DNA等操作。本試劑盒提供的Cas9核酸內切酶通過在蛋 白兩端加了核定位信號(NLS),可使蛋白進入細胞核內進行基因 組編輯。
產品特點:純蛋白體系,避免CRISPR基因敲除時引入質粒或病毒干擾。
產品用途:
1,基于蛋白與sgRNA轉染的非病毒載體CRISPR基因敲除;
2,基于蛋白與sgRNA轉染的非病毒載體CRISPR基因敲入;
3,sgRNA 剪切靶點DNA 效率檢測,降低體內篩選成本;
4,體外剪切靶 DNA 的特異位點。
應用實例:圖例)Cas9 Nuclease做 DNA片段切割活性檢測。
帶有靶位點的DNA片段為6100 bp;
酶切后的片段為3900 bp和 2200 bp。
保存溫度:-20℃保存,或-80℃長期保存。
NLS-Cas9 Nuclease 產品包裝(A包裝):
產品組成 | 體積 |
NLS-Cas9 Nuclease(1μg/ μL) | 50 μL |
10×Reaction Buffer | 500 μL |
*HKE365-02 系列為 5 μg/μL濃度,共 10μL。 |
體外切割體系(20μL):
dsDNA | 200 ng |
sgRNA | 200 ng |
NLS-Cas9 Nuclease | 0.5-1 μg |
10×Reaction Buffer | 2 μL |
RNase Free Water | 至 20 μL |
37 ℃保溫 1 h、70℃保溫 10 min
注:可在反應體系中添加 20U 的 RNase Inhibitor,防止 dsDNA 不純導致 sgRNA 的降解。
相關產品:
HKE366* | Cas9(D10A) Nickase |
HKE367** | Cas9(H840A)Nickase |
HKE368*** | Cas9(D10A,H840A) Nuclease |
HKE369 | sgRNA In Vitro one-step Transcription Kit |
HKE370 | sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit |
* 為 Cas9(D10A)Nickase,能在與 sgRNA 靶序列互補的 DNA 鏈上產生切口,從而形成功能性的單鏈斷裂,可以減 少意外的脫靶基因修飾。
** 為 Cas9(H840A)Nickase,能在與 sgRNA 靶序列非互 補的DNA 鏈上產生切口,從而形成功能性的單鏈斷裂,可以 減少意外的脫靶基因修飾。
*** 為 Cas9(D10A,H840A) Nuclease,具有靶DNA 結合活性, 但無切割活性,可用于陰性對照等用途。