最近瀏覽
產(chǎn)品名稱：Easy Digestion T-vector(pED-T)
產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格：
| 編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 價(jià)格 |
| HKT002-01A | Easy Digestion T-vector(pED-T) | 20次 | T載體 | 540 |
產(chǎn)品描述：
Easy Digestion T-vector是一種PCR產(chǎn)物高效TA克隆的專(zhuān) 用T載體，它由pTZ19R 載體改造而成。Easy Digestion T- vector在插入位點(diǎn)兩端特別設(shè)計(jì)了兩個(gè)BamH I位點(diǎn)，使插入片 段可以用BamH I單酶切檢測(cè)及亞克隆，另外還可以使用非常廉 價(jià)和高效的EcoR I與Hind III雙酶切檢測(cè)及亞克隆。
Easy Digestion T-vector 保留了pTZ19R 載體的所有功能： PCR 產(chǎn)物插入后可以利用 α-互補(bǔ)性進(jìn)行藍(lán)白斑篩選，挑選陽(yáng)性 克??；可以用M13F、M13R 通用引物對(duì)PCR 產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序；含 有T7 RNA 聚合酶的啟動(dòng)子，可以對(duì)插入片段進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄。
Easy Digestion T-vector(pED-T) 產(chǎn)品包裝（A包裝）：
操作方法：
1） 選擇合適的連接體系（詳細(xì)介紹見(jiàn)背面）。
2） 取10μL 加入至 100μL 感受態(tài)細(xì)胞中，用移液 槍吹打混合，冰上放置30 分鐘。
3） 將離心管置于 42℃水浴中，熱擊 60-90 秒，迅 速將離心管置于冰上，放置 2-3 分鐘。
4） 向每個(gè)離心管中加入 500μL 無(wú)菌不含抗生素的 LB 或SOC 培養(yǎng)基中，37℃搖床，150rpm 振蕩培養(yǎng) 45 分鐘，使質(zhì)粒上氨芐抗性基因表達(dá)，菌體復(fù)蘇。
5） 吸取200μL 已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含氨芐 青霉素的 LB 或SOC 固體平板上，用無(wú)菌涂布棒將細(xì) 胞均勻涂開(kāi)，將平板置于 37℃培養(yǎng)箱里直至液體完全 吸收，倒置培養(yǎng) 12-16 小時(shí)。
6） PCR檢測(cè)，利用試劑盒自帶的高速PCR擴(kuò)增試 劑2×FastTaq Mast Mix直接進(jìn)行菌落PCR鑒定。
