產(chǎn)品名稱:水生動(dòng)物病原 DNA/RNA 提取試劑盒(硅膠膜吸附柱法)
英文名稱:Aquatic Animal Pathogen DNA/RNA Extraction Kit
產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格:
編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
TQ001AH2 | 水生動(dòng)物病原 DNA/RNA 提取試劑盒(硅膠膜吸附柱法) | 50 份/盒 |
產(chǎn)品簡介:本試劑盒利用特制的裂解液和特異性吸附核酸的硅膠膜離心吸附柱,可以快速簡單地從各種水生動(dòng)物組織樣本中得到高質(zhì)量的病原體(病毒、致病菌)DNA 或 RNA。提取獲得的 DNA/RNA 純度高、質(zhì)量穩(wěn)定,適用于各種常規(guī)分子實(shí)驗(yàn)操作,包括反轉(zhuǎn)錄、PCR、RT-PCR、LAMP 檢測等。
試劑盒組成:
序號(hào) | 產(chǎn)品組成 | 規(guī)格 |
1 | 裂解液 | 30 mL |
2 | 蛋白酶 K | 1 mL |
3 | 去蛋白緩沖液 | 24 mL(使用前加 16 mL 無水乙醇) |
4 | 漂洗液 | 15 mL(使用前加 60 mL 無水乙醇) |
5 | 洗脫液 | 10 mL |
6 | 硅膠膜吸附柱(RNase-Free) | 50 套 |
儲(chǔ)存條件及有效期:室溫保存,有效期一年,2~8 ℃條件下儲(chǔ)存更佳,儲(chǔ)存過程中若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前將其在室溫放置一段時(shí)間或 37 ℃條件下溫育,待充分溶解后搖勻即可使用。蛋白酶 K 于 2~8 ℃儲(chǔ)存(-20 ℃長期保存)。
用戶自備材料與工具:
水生動(dòng)物病原 DNA/RNA 提取試劑盒(硅膠膜吸附柱法)使用方法:
● 初次使用前請(qǐng)確保去蛋白緩沖液和漂洗液中已按說明加入指定量的無水乙醇。
1、取適量的待檢水生動(dòng)物組織樣品加入 1~5 倍體積的生理鹽水進(jìn)行勻漿。
2、取 200 μL 勻漿液至 1.5 mL 離心管中,加入 500 μL 裂解液、20 μL 蛋白酶 K,渦旋振蕩混勻,65℃孵育 15 min。
3、12000 rpm 離心 2 min,小心吸取 400 μL 上清液至一個(gè)新的 1.5 mL 離心管中,加入 250 μL 無水乙醇,渦旋振蕩混勻,室溫靜置 3 min。
4、將上一步的全部液體加入到硅膠膜吸附柱上(吸附柱套入收集管中),12000 rpm 離心 1 min,倒掉濾液,吸附柱套回收集管。
5、加入 500 μL 去蛋白緩沖液,12,000 rpm 離心 1 min,倒掉濾液,吸附柱套回收集管。
?(去蛋白緩沖液初次使用前加入 16 mL 無水乙醇。)
6、加入 500 μL 漂洗液,12,000 rpm 離心 1 min,倒掉濾液,吸附柱套回收集管。
? (漂洗液初次使用前加入 60 mL 無水乙醇。)
7、重復(fù)步驟 6。
8、再次 12,000 rpm 離心 2 min,徹底去除吸附柱中殘留的液體。將吸附柱套入新的 1.5 mL 離心管中,打開蓋子,室溫放置 2 min,去除殘留的乙醇。
9、向吸附柱中央處懸空滴加 50~100 μL 洗脫液,室溫靜置 5 min,12,000 rpm 離心 2 min,離心所得液體即為待檢病原核酸溶液。短期保存可置于-20 ℃,長期保存應(yīng)置于-80 ℃。
注意事項(xiàng):
1、實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本試劑盒說明書,嚴(yán)格按操作步驟執(zhí)行。
2、本試劑盒提取所使用的一次性離心管和吸頭應(yīng)經(jīng)過高壓滅菌,且不含 DNase 和 RNase。
3、裂解液中含有胍鹽類蛋白變性劑,應(yīng)避免直接接觸皮膚,如有接觸請(qǐng)用大量清水沖洗。
4、實(shí)驗(yàn)后妥善處理所有樣本和試劑材料,徹底清潔和消毒操作臺(tái)面。